1. ¿Cuáles son las fuentes de errores más comunes de error en la tinción de Gram?
R//. Una mala fijación al calor sería un error en la tinción de Gram, por lo que se arrastraría toda la muestra en los siguientes procesos. Otros obstáculos que impide a la tinción de Gram son los errores del técnico. Para evitarlos hay que elegir bien los reactivos y ser muy cuidadosos al ejecutar la técnica.
 

2. Explique qué reacción de Gram  darán las levaduras.  Estos tendrán la misma importancia que para las bacterias.
R//. La reacción de Gram que dará las levaduras esta en el color, que depende de la composición de la pared celular de la levadura. Por lo que no tiene tanta importancia como las bacterias ya que en ellas existe toda una clasificación por medio del gram lo que no sucede con las levaduras.
 

3. Explique el fundamento de la Tinción negativa realizada en la práctica. Qué tipo de  información se obtiene.
R//. Con la tinción negativa lo que se tiñe es el medio, el colorante no penetra porque tiene carga negativa. En este caso las células no están coloreadas. La imagen es similar a las del campo oscuro, que se ven objetos más pequeños, la morfología externa, los apéndices, etc. La Tinción negativa es un modo satisfactorio de aumentar el contraste de las células en la microscopia óptica, pero su máxima utilidad está en revelar la presencia de cápsulas alrededor de las células bacterianas. Se usa in colorante sin afinidad a las células ya sea nigrosina o tinta china, formando una estructura coloidal con el medio, y no se pegan a las células.

4. Investigue  otra técnica de Tinción selectiva que permita observar otras estructuras bacterianas.
R//. La tinción selectiva se debe a que los colorantes tienen afinidad o son selectivos para ciertas estructuras de una célula. En el caso de las bacterias, las tinciones selectivas son de Gram, en donde se tiñen la pared celular. Otra técnica de tinción selectiva que permita observar las estructuras bacterianas son la tinción ácido alcohol resistente (Ziehl – Noelsen); se usa para determinar la presencia de bacterias de los géneros Mycobacterium y Nocardia. Se basa en la resistencia de estas bacterias a ser decoloradas con una mezcla ácido-alcohol, se debe a la alta concentración de lípidos de su pared, ácidos micólicos.
 

5. ¿A qué se debe el distinto comportamiento de las bacterias según sean Gram+ o Gram-?
R//. El distinto comportamiento en la Tinción se piensa que es debido a las diferentes capas superficiales o paredes de las dos bacterias (Tipos de Células). Ya que la Gram+ tiene la pared gruesa que se deshidrata con el etanol, mientras que en la Gram- la pared es más laxa, con mayor número de lípidos y el tratamiento con el alcohol desorganiza la pared y pierden el colorante.
6. ¿Para qué se necesita el aceite de inmersión?
R//. El aceite de inmersión se necesita para observar en el microscopio con el objetivo de 100X, es especial debido a su viscosidad que es de tipo A. El aceite de inmersión tiene un índice de refracción similar al del vidrio (1,5 aprox.).